Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en el VHB

 La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una prueba de certeza que amplifica secuencias de ADN de interés mediante el uso de cebadores. En el caso del VHB, se sugiere el uso de PCR en tiempo real (qPCR).

Objetivo: 

• Identificación de infección por VHB
• Cuantificar el genoma del VHB

Tipo de muestra biológica: 

• Suero del paciente
• Lisado celular
• Sobrenadante de cultivo celular

Tipo de ácido nucleico extraído: ADN viral

Kit: kit QIAamp DNA Mini (Qiagen, Hilden, Alemania) para las células, mientras que se utilizó un kit QIAamp MinElute Virus Spin (Qiagen) para los sobrenadantes libres de células.

Gen o secuencia a amplificar: Genoma entero

Polimerasa usada: Hi Fidelity y cebadores con sitios de restricción para la enzima BspQi

Tipo de PCR: PCR en tiempo real (qPCR)

Ciclos: 60-70

Bibliografía

https://ri.conicet.gov.ar/bitstream/handle/11336/83120/CONICET_Digital_Nro.b2c88add-92b0-4979-84bf-ce747e826da2_A.pdf?sequence=2&isAllowed=y